Abstrakt vědeckého článku o jiných lékařských vědách, autor vědecké práce – Arzymbetova Zh.Kh., Akhmetova A.T., Nurgalieva K.Zh.
V posledních desetiletích dochází k nárůstu výskytu listeriózy, což je spojeno jak se skutečným vzestupem incidence, tak se zkvalitněním laboratorní diagnostiky. Pro zvýšení inokulovatelnosti bakterií se používá použití selektivních médií a metoda studeného obohacení. Schéma pro izolaci Listeria, v závislosti na kontaminaci a počtu Listeria ve studovaném materiálu, zahrnuje buď přímé naočkování na selektivní agar nebo obohacení materiálu v selektivních bujónech.
Podobná témata vědeckých prací z jiných lékařských věd, autorkou vědecké práce je Arzymbetova Zh.Kh., Akhmetova A.T., Nurgalieva K.Zh.
Biologické vlastnosti kmenů Listeria monocytogenes izolovaných na nových domácích selektivních živných půdách z klinického materiálu pro diagnostiku listeriózy u těhotných žen a novorozenců
Současné problémy při kontrole šíření Listeria a infekcí způsobených Listeria monocytogenes
Ondatra pižmová (Ondatra zibethicus (L.)) v severním Kyrgyzstánu je součástí přírodních ohnisek antropozoonóz
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA LISTERIÓZY
Během posledních 10 let výskyt listeriózy všude trvale narůstá. Důvody pro tuto skutečnost jsou 2, skutečný nárůst incidence i zlepšení laboratorní diagnostiky. Pro zvýšení kvality testování Listeria specialisté doporučují používat selektivní kultivaci a metodu studeného pronikání. Schéma alokace Listerií v závislosti na kontaminaci a množství Listerií ve vyšetřovacím materiálu zahrnuje buď přímé naočkování na selektivní agar nebo obohacení materiálu na selektivní bujóny.
Text vědecké práce na téma “Laboratorní diagnostika listeriózy, experimentální a klinické studie”
CEREBROVASKULÁRNÍ PATOLOGIE JSOU PERIOPERATIVNÍ FAKTOR MIMOKRARDNÍHO CHIRURGIE RIZIKA
Západní Kazachstán Státní lékařská univerzita Marata Ospanova, Katedra terapie Fakulta postgraduálního vzdělávání, město Aktobe
Článek se zabývá otázkami prevalence cerebrovaskulárního onemocnění, možnostmi jeho průběhu a rysy managementu pacientů s cerebrovaskulárním onemocněním v perioperačním období u nekardiochirurgických operací.
Klíčová slova; cerebrovaskulární patologie, ischemická cévní mozková příhoda, rizikový faktor, perioperační riziko.
J.H. ARZYMBETOVÁ A.T. AKHMETOVÁ, K.ZH. NURGALIEVA
LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA LISTERIÓZY
Protimorová stanice Aktobe, Aktobe
V posledních desetiletích je všude pozorován nárůst výskytu listeriózy, který je spojen jak se skutečným nárůstem výskytu, tak se zlepšením laboratorní diagnostiky. Pro zvýšení inokulovatelnosti bakterií se používá použití selektivních médií a metoda studeného obohacení. Schéma pro izolaci Listeria, v závislosti na kontaminaci a počtu Listeria ve studovaném materiálu, zahrnuje buď přímé naočkování na selektivní agar nebo obohacení materiálu v selektivních bujónech.
Klíčová slova: laboratorní diagnostika, listerióza.
Struktura lidské infekční patologie v posledních desetiletích dvacátého století prošla významným vývojem, a to jak díky objevu řady dříve neznámých infekčních agens, tak i změnou role dříve dobře známých patogenů. Do druhé skupiny lze plně zařadit i listeriózu. Přestože jsou zmíněné mikroorganismy epidemiologům, bakteriologům a specialistům na infekční onemocnění již dlouho známy, v posledních letech se podíl infekcí, které způsobují, i spektrum jejich klinických projevů znatelně rozšiřuje. K tomu přispěl na jedné straně výrazný pokrok v oblasti laboratorní a klinické diagnostiky, na druhé straně antropogenní přeměna vnějšího prostředí, která ovlivnila podmínky reprodukce patogenů, přenosové cesty infekce a náchylnost k jde o rizikové skupiny lidské populace, především ty s různými typy imunodeficiencí [1,2,3]. I přes pokrok v laboratorní diagnostice infekčních onemocnění si problematika diagnostiky listeriózy zaslouží zvýšenou pozornost a další studium. Naším úkolem bylo seznámit široké spektrum praktických lékařů, především bakteriologů a infekčních specialistů, s moderními metodami diagnostiky této infekce.
Až do počátku 80. let byly hlavními složkami laboratorní diagnostiky listeriózy izolace kultur na živných půdách, barvení nátěrů z klinického materiálu v kombinaci se sérologickými diagnostickými metodami. Nárůst počtu sporadických případů a epidemiologických ohnisek však přispěl k identifikaci četných zranitelností tradiční diagnostiky [4,5,6].
K diagnostice listeriózy se u nás nejvíce používají sérologické metody výzkumu. Zpravidla se jedná o různé možnosti aglutinačních testů, jejichž použití upravují instruktážní dokumenty schválené v roce 1987 Ministerstvem zdravotnictví a Státním zemědělským průmyslem SSSR: „Laboratorní diagnostika listeriózy u zvířat a lidí, kontrola a preventivní opatření“, „Pokyny k epidemiologii,
12 kazašských lékařských časopisů Batys č. 2 (30) 2011 / ‘ ‘
__/ Medical Journal of Western Kazachstan č. 2 (30) 2011
epizootologie, prevence, klinika a léčba listeriózy u lidí a zvířat“, Příloha CPR. RK č. 946/326 ze dne 17.10. 2002 a společné usnesení Ministerstva zdravotnictví Republiky Kazachstán a Ministerstva zemědělství č. 507 ze dne 16.08.2007 „O schválení hygienicko-epidemiologických, veterinárně-hygienických pravidel a norem „Organizace epidemiologicko-epizootologického dozoru a provádění sanitárních-protiepidemických (preventivních) a veterinárně-preventivních (antiepizootologických) opatření polysteriosus v Republice Kazachstán“.
V praxi se v laboratorní diagnostice listeriózy nejčastěji používají dvě sérologické metody: komplement fixační reakce s inaktivovaným cytoplazmatickým antigenem a nepřímá hemaglutinační reakce s erytrocytárním antigenním diagnosticem. Přitom ještě v roce 1967 jeden ze zakladatelů tuzemské školy badatelů listeriózy, akademik I.A. Bakulev upozornil na nedostatečnou specificitu sérologických reakcí pro diagnostiku listeriózy. Podobné názory zastával i největší odborník na problém listeriózy, německý vědec Seeliger, který napsal, že „hodnocení sérologických dat by mělo být prováděno s velkou opatrností a současně, spolu s epidemiologickými rysy, klinický obraz je třeba také vzít v úvahu“ [7].
Jak však správně poznamenávají orgány hygienického a epidemiologického dozoru zemí SNS, metody laboratorní diagnostiky listeriózy se za posledních 30 let prakticky nezměnily, přičemž epidemiologický význam infekce stále roste [8,9].
Sérologické metody si však plně zachovávají svůj význam pro objasnění epizootologické a epidemiologické situace, neboť výsledky sérologických studií sice poskytují určité informace o kontaktu různých populačních či rizikových skupin s patogenem, ale neumožňují diagnostikovat listeriózu s vysokým stupněm přesnost i při použití několika sérologických metod.
Hlavní metodou diagnostiky infekčního procesu je bakteriologická diagnostika a identifikace patogenu. Bakteriologická diagnostika listeriózy prošla v posledních letech výrazným vývojem. Významný pokrok v oblasti metod obohacování studovaného materiálu a konstrukce kultivačních médií pro izolaci Listerií zpřístupňuje postup izolace a identifikace Listerií širokému spektru praktických mikrobiologických laboratoří.
Při podezření na listeriózu se vyšetření provádí především z krve a mozkomíšního moku u septických forem, meningitidy a menigoencefalitidy, mekonia u novorozeneckých onemocnění, plodové vody, placenty a výtoku z porodních cest u žen po porodu. mrtvý plod. V případě zatížené porodnické anamnézy, patologického průběhu těhotenství, zánětu vaječníků, děložního čípku je vyšetření na přítomnost listerií povinnou součástí rozšířeného vyšetření genitálního traktu.
U méně častých klinických forem listeriózy podléhá vyšetření obsah abscesu, exsudátu a výtoku z nosohltanu. Biologický materiál pro mikrobiologický výzkum listeriózy by měl být odebírán za co nejsterilnějších podmínek, pečlivě dodržovat pravidla asepse a antisepse a pokud možno zamezit kontaminaci vzorků mikroorganismy z prostředí [10,11].
Pro úspěšnou izolaci Listeria z klinického materiálu i z potravy je nezbytný postup obohacení. S výjimkou mozkomíšního moku je klinický materiál a zejména potravinářské výrobky silně kontaminovány doprovodnou mikroflórou. Vzhledem k obecnému mikrobiálnímu pozadí může být počet listerií ve studovaném materiálu malý, rychlost růstu listerií je nižší než u mnoha oportunních bakterií, proto je postup obohacení a kompetentní použití selektivních faktorů často nezbytnou podmínkou pro izolaci kulturních listerií ze studovaného materiálu [11,12].
Již ve 40. letech 13,14,15. století se k izolaci Listeria začal používat postup studeného obohacení a přidání teluritu draselného do média [XNUMX].
Metoda obohacování za studena je založena na chrofilní povaze Listeria, jejich schopnosti reprodukovat se při nízkých teplotách. Technika zahrnuje kromě obvyklého naočkování testovaného vzorku na živná média i uložení části testovaného materiálu v chladničce při teplotě + 4 °C po dobu 2 měsíců. Týdenní očkování materiálu skladovaného v chladu na standardní živná média často vedlo k pozitivnímu výsledku, když počáteční očkování materiálu s podezřením na listerii bylo negativní. I když inkubace při 4°C
„ , _I I „„ _______ ^^ Batys Kazachstán lékařské časopisy č. 2 (30) 2011 13
Medical Journal of Western Kazachstan č. 2 (30) 2011 _____!_
inhibuje většinu cizorodé mikroflóry, snižuje se také rychlost růstu listerií na začátku procedury. Proto se v současné době tato metoda v laboratorní diagnostice příliš nepoužívá.
Vzhledem k tomu, že metoda obohacování za studena není použitelná v laboratorní diagnostické praxi z důvodu nutnosti dlouhodobé expozice, zahrnuje postup obohacování kontaminaci testovaného materiálu selektivními činidly a inkubaci při 30 °C po dobu 24 hodin s následným nanesením na selektivní agar. [4,15].
Telurit draselný bylo doporučeno přidávat do různých živných médií (masový peptonový agar, krevní agar) k izolaci listerie jako faktoru, který inhibuje růst mnoha gramnegativních bakterií. Následně byla jako selektivní činidla pro izolaci použita široká škála chemických sloučenin, solí kovů, antibiotik a barviv. Z nich největší praktický význam získaly chlorid lithný, akriflavin, kyselina nalidixová a cykloheximid, které jsou součástí nejběžnějších živných médií a obohacovacích bujónů [7].
V poslední době se pro diagnostiku a typizaci rozšířily metody založené na analýze DNA. Je to dáno jejich vysokou specifičností a také relativní technickou jednoduchostí a dostupností.
Dnes nejrozšířenější a nejslibnější metodou molekulárně genetické diagnostiky je polymerázová řetězová reakce (PCR). PCR je založena na umělé syntéze fragmentu DNA, jako templát je použita DNA studovaného mikroorganismu. Metoda je velmi citlivá a specifická. Při vyšetření klinického materiálu na listeriózu v naší laboratoři od 73 osob, s negativními sérologickými reakcemi, byl metodou PCR ve 40 % případů zjištěn pozitivní výsledek na tuto infekci. Bibliografie:
1. Návod na epidemiologii, epizootologii, prevenci, klinický obraz a léčbu listeriózy u lidí a zvířat. Příloha k nařízení Ministerstva zdravotnictví Republiky Kazachstán č. 946/326 ze dne 17.
2. Dmitrovský A.M., Stěpanov V.M. Musabeková I.N. a další Ekologické a sociální základy listeriózy. V sobotu „Problémy prevence infekčních chorob v populaci Kazachstánu“ // Almaty-2002. S486-489.
3. Karlikanová N. R., Kuvaeva I. B. ,Karlíková N. S . Listerióza v mléce a mléčných výrobcích – Moskva
4. Tartakovskij I.S. Listeria: role v lidské infekční patologii a laboratorní diagnostice // KMAH-2000-Vol.2-No.2-S. 1-15.
5. Karpova T.I., Ermolaeva S.A., Lopyrev I.V. Nové diagnostické metody pro identifikaci Listeria monocytogenes/Zhlinicheskaya microbiology-2001 -№3-С. 266-273.
6. KarpovaT. A . , Šustrová N. M. , Snegireva A. E. Rozmnožování listerií v mléčných výrobcích // Journal of Microbiology – 2001 – č. 1- S. 80-81
7. Tartakovsky I.S., Maleev V.V., Ermolaeva S.A. Listeria: role v lidské infekční patologii a laboratorní diagnostice – M: „Medicine for All“ – 2002-195 s.
8. Rodina L.V., Manenková G.M., Štěpánová N.V. Epidemický stav dozor nad listeriózou //Ve sborníku „Listerióza na přelomu tisíciletí“ – Pokrov-1999. s. 172-174
9. Salova N.Ya., Golovanova V.P., Shesteperova T.I., Současný stav laboratorní diagnostiky listeriózy v důstojnosti. epid. služba města Moskvy // Ve sbírce. Listerióza na přelomu tisíciletí“ – Pokrov-1999, s. 68-71.
10. Litvin V.Yu., Emelyanenko E.N., Pushkareva V.I. Patogenní bakterie běžné pro lidi a rostliny: problémy a fakta // Journal of Microbiology -1996- č. 2-S. 101-104
11. Tartakovskij I.S., Trofimová O.D. Etiologie a mikrobiologická kontrola nozokomiálních infekcí // Adresář nemocničního epidemiologa – M.-1999-19-29.
12. Tartakovsky I.S., Sheveleva S.A., Karpova T.I. Metodické přístupy k izolaci a identifikaci Listeria // Ve sborníku: „Preventivní medicína – praktická zdravotní péče“
– sv. 1 – částP-M-2001 s. 92-94.
13. Sharma R.K. Detekce listerií v produktech moří a oceánů // Ve sbírce. “Listerióza na přelomu tisíciletí” – Pokrov-1999-S. 97-99.
14. Bakulov I.A., Vasiliev D.A. Listerióza jako alimentární toxická infekce.// Problematika diagnostiky a prevence – Uljanovsk-1991.-45c.
15. Štěpánov V. M. , Dmitrovský A. M. , Merker V. A Metodické pokyny k etiologii, epidemiologii epizootologie, klinice, léčbě a laboratorní diagnostice cisteriózy“ – Almaty – 2003. – 34s.
14 kazašských lékařských časopisů Batys č. 2 (30) 2011 / ‘ ‘
__/ Medical Journal of Western Kazachstan č. 2 (30) 2011
J.H. ARZYMBETOVÁ, A.T. AKHMETOVÁ, K.ZH. LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA NURGALIEVA LISTERIOZDYN
Aktebe obaga karsy stantsiya, Aktebe kalasy
Sotsgy on zhylda zhappay listeriozben aurushachdylyktych ecyi Baikalady, ol aurushachdylyktych shynai keteriluimen Katar, laboratorlykdiagnosticsanychzhaksaruymen de baylanysty bakterienych esimdiligin zhaksartu maksatynashenye select nylady. Listeria belip alu sulbesshe, listeria sanina zhene kontaminace syn teweldi zertteu materialinda agarga sebu nemese materialdy selectivti sorpada kaniktyru bolada.
Neg’zg’! vzder: laboratorní diagnostika, listerióza.
ZH. H. ARZYMBETOVÁ, AT AXMETOVÁ, K.ZH. LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA LISTERIÓZY NURGALIJEVA
Antiplague stanice Aktobe, město Aktobe
Během posledních 10 let výskyt listeriózy všude trvale narůstá. Důvody jsou 2 – skutečný nárůst incidence i zlepšení laboratorní diagnostiky. Pro zvýšení kvality testování Listeria specialisté doporučují používat selektivní kultivaci a metodu studeného pronikání. Schéma alokace Listerií v závislosti na kontaminaci a množství Listerií ve vyšetřovacím materiálu zahrnuje buď přímé naočkování na selektivní agar nebo obohacení materiálu na selektivní bujóny.
Listerióza je infekční onemocnění způsobené Listeria monocytogenes, které má mnoho přenosových mechanismů a vyznačuje se řadou klinických projevů – od asymptomatického bakteriálního nosičství až po nebezpečně smrtelnou meningitidu a meningoencefalitidu.
Sérologický krevní test na IgG protilátky proti Listeria monocytogenes se provádí k diagnostice listeriózy a umožňuje odhalit patologii, provést požadovanou terapii a zabránit rozvoji komplikací.
Imunitní systém reaguje na zavedení Listeria monocytogenes do organismu tvorbou specifických protilátek – imunoglobulinů, jejichž aktivita je zaměřena na ničení patogenních agens. Protilátky třídy IgG začnou cirkulovat v krvi, a proto jsou detekovány během laboratorní diagnostiky, v průměru 10-20 dní po infekci. Poté, co se pacient uzdraví, zůstávají tyto protilátky v krevním řečišti dlouhou dobu. V tomto ohledu může jejich detekce při sérologickém rozboru indikovat současnou i minulou listeriózu.
Obecné informace o analýze
Listeria monocytogenes je intracelulární parazit, tyčinkovitá bakterie, která způsobuje listeriózu. Onemocnění se přenáší především potravou, vyskytují se i mechanismy přenosu vzduchem, kontaktem a vertikálním přenosem. Hlavními přenašeči Listeria monocytogenes jsou zvířata (psi, kočky, skot, hlodavci), ptáci a také infikovaní lidé, včetně těch, kteří jsou asymptomatickými přenašeči bakterie.
Délka inkubační doby se pohybuje od několika dnů do dvou měsíců. V případě infekce jídlem je to obvykle 14-20 dní. Klíčovou roli při vzniku listeriózy hraje stav imunity. U osob s oslabeným imunitním systémem je pozorován závažnější průběh patologie. Příznaky listeriózy jsou nespecifické a závisí na formě onemocnění. Nejčastější gastroenterická forma je doprovázena výrazným zvýšením teploty, zvracením, nevolností, průjmem a bolestmi břicha. U anginózní-glandulární formy listeriózy je klinický obraz podobný projevům anginy: zvětšené mandle, silná bolest v krku, zvětšené lymfatické uzliny, horečka. Největší nebezpečí představuje neurologická forma, která se vyskytuje ve formě encefalitidy nebo meningitidy.
Pravděpodobnost vzniku listeriózy se v těhotenství výrazně zvyšuje. Infekce může způsobit patologické těhotenství a vést k potratu, předčasnému porodu a mrtvému porodu. Transplacentární infekce plodu může způsobit jeho smrt. Listerióza u novorozenců je v 80 % případů smrtelná, doprovázená sepsí nebo meningitidou.
Vzhledem k podobnosti klinického obrazu listeriózy s mnoha onemocněními hraje při stanovení diagnózy klíčovou roli laboratorní diagnostika.
Kdy je objednána analýza?
Sérologické vyšetření krve na IgG protilátky proti Listeria monocytogenes je předepsáno v následujících případech:
- diagnóza listeriózy v přítomnosti charakteristického klinického obrazu;
- preventivní vyšetření vysoce rizikových pacientek (těhotné ženy, zejména s komplikovanou porodnickou anamnézou, novorozenci, senioři, osoby s imunodeficiencí, pracovníci v chovech hospodářských zvířat, potravinářská výroba);
- diferenciální diagnostika listeriózy s chorobami, které mají podobný komplex symptomů (angina pectoris, infekční mononukleóza, akutní střevní infekce, toxoplazmóza, meningitida, encefalitida);
- sepse neznámé etiologie u novorozence;
- detekce přenosu bakterií Listeria monocytogenes.
Jak se připravit na analýzu
Při přípravě na sérologický test je nutné dodržovat lékařská doporučení zaměřená na zajištění spolehlivosti výsledků analýzy:
- žilní krev se daruje ráno, výhradně nalačno, s dodržením hladovění 8 hodin pro dospělé, 2 hodiny pro děti ve věku 1-5 let, 30 minut pro kojence do jednoho roku;
- v den odběru biomateriálu nelze pít čaj, kávu ani jiné nápoje než čistou pitnou vodu. Při vyšetření kojenců je třeba jim podat 200 ml převařené vody, přičemž tekutinu podáváme v malých dávkách půl hodiny před zákrokem;
- dva dny před sérologickým testem byste neměli jíst smažená a tučná jídla, přejídat se a vyhýbat se pití alkoholických nápojů;
- v předvečer analýzy minimalizujte fyzickou aktivitu, odmítněte těžkou práci, navštěvujte sportovní trénink nebo zvedněte závaží. Odstraňte psycho-emocionální stres;
- několik hodin před odběrem krve se zdržet kouření (včetně elektronických cigaret);
- Krev je nutné darovat před instrumentálním vyšetřením a fyzioterapeutickou léčbou nebo týden po nich;
- po předchozí domluvě s odborníkem den předem vysadit všechny léky. Antibakteriální terapie musí být dokončena nejméně dva týdny před testem.
Metoda výzkumu
Vzorek žilní krve podléhá sérologické diagnostice. Kvalifikovaný zkušený laborant provede venepunkci a získá 5 ml vzorek krve, který se odešle do sterilní zkumavky. Dále je krev odstředěna, tedy podrobena vysokorychlostní rotaci, která zajistí oddělení plazmy, ve které jsou koncentrovány všechny protilátky, od ostatních krevních elementů. Provádí se enzymatická imunoanalýza k rozpoznání protilátek proti Listeria monocytogenes díky jejich schopnosti vázat se na antigeny a vytvářet imunitní komplexy.
Pomocí lékařské injekční stříkačky se plazma rozdělí do jamek polystyrénové destičky použité pro testování. Je tam přidán i konjugát – molekula obsahující antigeny Listeria monocytogenes. Pracovní deska se přenese do inkubačního zařízení – speciálního zařízení, jehož teplota je podobná teplotě lidského těla. Zde, pokud jsou požadované protilátky přítomny v plazmě, interagují s antigeny. Detekce vytvořených imunokomplexů a identifikace protilátek třídy IgG proti Listeria monocytogenes se provádí automaticky pomocí speciálního přístroje – fotokalorimetru, který zvyšuje spolehlivost výsledků laboratorní diagnostiky.
Dešifrovací analýza
Výsledky sérologické diagnostiky na protilátky třídy IgG proti Listeria monocytogenes mají kvalitativní formát a jsou vydávány na lékařském formuláři v jedné z možných hodnot: „pozitivní“, „negativní“.
Pozitivní výsledek, indikující detekci požadovaných protilátek v krvi a v důsledku toho infekci listeriózou, se objeví, když je míra pozitivity vyšší než 1 U/ml, a může znamenat:
- současná listerióza;
- přenesená listerióza;
- chronický bakteriální přenos Listeria monocytogenes.
Akutní forma onemocnění je indikována zvýšením titru protilátek IgG nejméně 4krát v párových sérech a přítomností charakteristických klinických příznaků patologie.
Pokud jsou protilátky detekovány v míře pozitivity nepřesahující 0,89 U/ml, je výsledek testu považován za negativní. Může naznačovat:
- nepřítomnost infekce Listeria monocytogenes;
- rané období rozvoje listeriózy, před tvorbou IgG protilátek v krvi proti původci onemocnění.
Riziko získání falešných hodnot nelze vyloučit. Takže s nedostatečnou imunitní odpovědí nebo její nepřítomností, která je pozorována v důsledku přítomnosti patologií ve fungování imunitního systému, se výsledky často ukáží jako falešně negativní. V tomto případě, když je tělo infikováno Listeria monocytogenes, protilátky proti němu se nevytvářejí. Falešně pozitivní hodnoty mohou být způsobeny poškozením vyšetřovaného organismu stafylokoky, streptokoky a klostridiemi.
Výsledky sérologické studie dešifruje ošetřující lékař, který při stanovení diagnózy bere v úvahu anamnézu pacienta a klinický obraz patologie. V případě potřeby mohou být předepsány další testy a vyšetření.
